Diagnostik  >  Labordiagnostik  >  Mikrobiologische Diagnostik

 
Gramfärbung (Rudiment)
 

Suche - Erweiterte Suche

 

Artikelnavigation 

Methode
Indikationen
Durchführung
Messungen
Komplikationen
Kontraindikationen
Bewertung
Referenzen
Editorial
Kommentare
Auf einen Blick
 

Autor

Tobias Schäfer
 

Login

Benutzername

Passwort

 

Impressum

Impressum
Copyright
Bildrechte
Kontakt
 
 
 
 

 Methode
 

 

 

 

Differentialfärbung zum Nachweis grampositiver und gramnegativer Bakterien.

 

 

 
 Indikationen
 

 

 

 
 Durchführung
 

  • Karbol-Gentianaviolett-Lösung:
    • 10 ml Gentianaviolett-Stammlösung
    • 1 ml Acid. carbol. liquefact.
    • 100 ml a.d.
    • Vor jedem Gebrauch filtrieren!
  • alternativ: Karbol-Methylviolett-Lösung
    • 10ml Methylviolett-Stammlösung
    • 1ml Acid. carbol. liquefact.
    • 100ml a.d.
  • Acid. Carbol. Liquefact.
    • 10 Teile Phenol DAB unter geringer Hitze lösen (Abzug !)
    • 1 Teil a.d. zugeben
  • Lugolsche Lsg.
    • 100,0 g Kaliumiodid (reinst)
    • in 700ml a.d. lösen
    • 50,0 g Iod resublimiert zugeben
    • auf 1000ml mit a.d. auffüllen
    • filtrieren
    • in verschiedenen Literaturquellen findet man verschiedene Konzentrationsangaben für Kaliumiodid und Iod, allen gemeinsam ist das Verhältnis von 2:1 von Kaliumiodid zu Iod.
  • Karbolfuchsin, konzentriert:
    • 4,5ml Acid. carbol. liquefact.
    • 90ml a.d.
    • 10ml Fuchsin(NB)-Stammlsg.
    • oder:
    • 100ml 5%ige Phenollsg.
    • 10ml Fuchsin(NB)-Stammlsg.

  • Ausstrich lufttrocknen und hitzefixieren
  • Gentianaviolett oder Kristallviolett, 1-3 min
  • Farbstoff abkippen, abspülen mit Lugol (nicht mit Wasser); überschichten mit Lugol; 2-3 min einwirken lassen
  • Lugol abkippen
  • Entfärben mit Aceton-Ethanol 1:4 (oder 3:97)
  • Abspülen mit destilliertem Wasser
  • Gegenfärben mit verdünntem Carbolfuchsin (1:10 - 1:20), 15 sec - 1 min
  • Abspülen mit destilliertem Wasser
  • in Fliesspapier trocknen

 
 Messungen
 

  • Grampositive Bakterien: blau (Zellwand verhindert Elution des Farbstoff-Jod-Komplexes)
  • Gramnegative Bakterien: rot
  • Gramlabilität: bei Kulturen mit autolytischen Enzymen Abbau der Zellwand möglich: grampositive sehen wie gramnegative Bakterien aus

 



Grampositive Kokken



Gramnegative Kokken



Grampositive Stäbchen



Gramnegative Stäbchen

 

 
 Nebenwirkungen und Komplikationen
 

 

 

 
 Kontraindikationen
 

 

 

 
 Bewertung
 

 

 

 
 Referenzen
 

 

 

 

http://www.personal.psu.edu/faculty/j/e/jel5/biofilms/gramstain.html

 

 
 Editorial
 

Tobias Schäfer

22.07.2004

 

 

RUDIMENT

Lizenz für freie Inhalte

 
 Kommentare
 
 
 

Verwandte Artikel

Bakterien

 
   Anzeige