| Methode |
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Methode |
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Differentialfärbung zum Nachweis grampositiver und gramnegativer Bakterien.
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| Indikationen |
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| Durchführung |
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Vorbereitung |
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- Karbol-Gentianaviolett-Lösung:
- 10 ml Gentianaviolett-Stammlösung
- 1 ml Acid. carbol. liquefact.
- 100 ml a.d.
- Vor jedem Gebrauch filtrieren!
- alternativ: Karbol-Methylviolett-Lösung
- 10ml Methylviolett-Stammlösung
- 1ml Acid. carbol. liquefact.
- 100ml a.d.
- Acid. Carbol. Liquefact.
- 10 Teile Phenol DAB unter geringer Hitze lösen (Abzug !)
- 1 Teil a.d. zugeben
- Lugolsche Lsg.
- 100,0 g Kaliumiodid (reinst)
- in 700ml a.d. lösen
- 50,0 g Iod resublimiert zugeben
- auf 1000ml mit a.d. auffüllen
- filtrieren
- in verschiedenen Literaturquellen findet man verschiedene Konzentrationsangaben für Kaliumiodid und Iod, allen gemeinsam ist das Verhältnis von 2:1 von Kaliumiodid zu Iod.
- Karbolfuchsin, konzentriert:
- 4,5ml Acid. carbol. liquefact.
- 90ml a.d.
- 10ml Fuchsin(NB)-Stammlsg.
- oder:
- 100ml 5%ige Phenollsg.
- 10ml Fuchsin(NB)-Stammlsg.
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Durchführung |
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- Ausstrich lufttrocknen und hitzefixieren
- Gentianaviolett oder Kristallviolett, 1-3 min
- Farbstoff abkippen, abspülen mit Lugol (nicht mit Wasser); überschichten mit Lugol; 2-3 min einwirken lassen
- Lugol abkippen
- Entfärben mit Aceton-Ethanol 1:4 (oder 3:97)
- Abspülen mit destilliertem Wasser
- Gegenfärben mit verdünntem Carbolfuchsin (1:10 - 1:20), 15 sec - 1 min
- Abspülen mit destilliertem Wasser
- in Fliesspapier trocknen
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| Messungen |
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Normalwerte |
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- Grampositive Bakterien: blau (Zellwand verhindert Elution des Farbstoff-Jod-Komplexes)
- Gramnegative Bakterien: rot
- Gramlabilität: bei Kulturen mit autolytischen Enzymen Abbau der Zellwand möglich: grampositive sehen wie gramnegative Bakterien aus
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Interpretation |
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Grampositive Kokken
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Gramnegative Kokken
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Grampositive Stäbchen
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Gramnegative Stäbchen
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| Nebenwirkungen und Komplikationen |
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| Kontraindikationen |
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| Bewertung |
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| Referenzen |
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Links |
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http://www.personal.psu.edu/faculty/j/e/jel5/biofilms/gramstain.html
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| Editorial |
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Autor |
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Tobias Schäfer
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Erstellt |
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22.07.2004
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Status |
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RUDIMENT
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Freigabe |
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ALL
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Copycheck |
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1 - überprüft
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Licence |
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Lizenz für freie Inhalte
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| Kommentare |
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