Prinzip der indirekte Immunfluoreszenz:
Patientenseren werden in Sorbent verdünnt, um unspezifische Antikörper zu entfernen. Die absorbierten Proben werden auf das Treponema-pallidum-Antigen aufgetragen und inkubiert. Sind spezifische Antikörper vorhanden, findet eine Antigen-Antikörper-Reaktion statt. Dieser Komplex bindet Fluoreszein-markiertes Antihuman-γ-Globulin. Die daraus resultierende Reaktion zeigt eine leuchtende grüne Fluoreszenz der Treponemen.