Methode

Die Papanicolaou-Färbung wird in der gynäkologischen Zytologie (v.a. Abstriche von Cervix und Portio) zum Tumorzellnachweis und Funktionsdiagnostik der Ovarien benutzt, aber auch zur Untersuchung von Sputum, Bronchial-, Magen-und Darmsekreten sowie der Prostatazytologie eingesetzt. Sie erfüllt drei wichtige Kriterien für cytologische Färbungen:

• Gute Darstellung der Kernstruktur (wichtigstes Unterscheidungsmerkmal zwischen normalen und Tumorzellen)
• Transparente Färbung des Cytoplasmas (auch übereinander gelagerte Zellen sind gut erkennbar)
• Unterschiedliche Anfärbbarkeit bei Zellen verschiedener Reifegrade (Erleichterung der Zellbild-Beurteilung in verschiedenen Zyklusphasen)

Indikationen

Routinefärbung in der gynäkologischen Zytologie

Durchführung

Färbeprotokoll:

• feuchtfixierte Abstriche 2x in 70%igen Alkohol (bei Merckofix: 50%)
• Abspülen in Aqua dest.
• 5 min in Papanicolaous Lösung 1a (= Harris Hämatoxylin) => regressiv, physiko-chem. Färbemechanismus (positiv geladener Metall-Hämatein-Komplex bindet sich an negativ geladene Phosphatreste der Zellkern-DNA)
• 5 min bläuen in fließendem Leitungswasser (Farbumschlag nach blau und Fixierung der Farbe im Zellkern durch leichte Alkalität des Leitungswasser)
• einmal kurz in HCL-Alkohol tauchen (es gehen rotbraune Farbwolken ab) => Differenzieren
• 5 min bläuen in fließendem Leitungswasser
• 70%iger Alkohol (2x wechseln)
• 96%iger Alkohol
• 5 min Papanicolaous Lösung 2a ( = Orange G ) => progressiv; physikalische Farbreaktion
• Spülen in 85%igem Alkohol
• Spülen in 96%igem Alkohol ( 2x wechseln )
• 5 min Papanicolaous Lösung 3b ( = Polychromlösung EA 50 = Eosin, Lichtgrün, Bismarkbraun ) => physiko-chem. Farbreaktion
• Spülen in 96%igem Alkohol
• Entwässern in absolutem Alkohol ( 2x wechseln )
• Xylol ( 2x wechseln )
• Eindecken in Eukitt

Normalwerte

Färbeergebnis:

• Zellkerne: dunkelblau bis violett ( Harris Hämatoxylin )
• cyanophiles Cytoplasma der Basalzellen: tiefblau (Lichtgrün, Bismarckbraun)
• cyanophiles Cytoplasma der Parabasalzellen: blaugrün (Lichtgrün, Bismarckbraun)
• cyanophiles Cytoplasma der Intermediärzellen: blaß grünblau (Lichtgrün, Bismarckbraun)
• eosinophiles Cytoplasma der Superficialzellen: rosa (Eosin)
• Erys: rot (Orange G, Eosin)
• Keratin: orange (Orange G, Eosin )
• Schleim: grau-blau ( Lichtgrün, Bismarckbraun )

Meßfehler

• Farblösung verbraucht (=> kühl und dunkel lagern, wöchentlich erneuern )
• Niederschläge im Präparat (=> Farblösung immer vor Gebrauch filtrieren)
• Spülalkohole zu alt (=> regelmäßig erneuern)
• Nur klares Xylol zum Klären der Schnitte verwenden
• Küvetten sind nicht genügend hoch gefüllt
• unpräzises Eindecken

Interpretation

Beurteilung des Abstriches erfolgt mit Hilfe der Münchner Nomenklatur II (1989)
A Qualität des Abstriches (ausreichend - bedingt ausreichend - nicht ausreichend) mit Begründung
B Proliferationsgrad nach Schmitt
C Mikroorganismen: Döderlein-Flora mit/ohne Cytolyse; Mischflora; Kokken/Gardanella; Pilze; Trichomonaden; Viren
D Klassifikation des cytologischen Befundes (Dignitätsdiagnostik

• I normales Zellbild
• II deutliche entzündliche Veränderungen
• III unklarer Befund
• III D Zellen einer Dysplasie
• IV schwere Dysplasie oder Carzinoma in situ
• IVa schwere Dysplasie oder Carzinoma in situ, invasives Karzinom nicht auszuschließen
• V Zellen eines malignen Tumors

Autor

Sabine Petersdorf

Erstellt

15.12.2003

Status

TRACK2

Freigabe

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